Eficacia de un kit comercial basado en la tecnología LAMP para la detección rápida de Bursaphelenchus xylophilus en Pinus pinaster

Resumen

Objetivo del estudio: Evaluar la utilidad del kit comercial de detección de Bursaphelenchus xylophilus (Steiner & Burher) Nickle basado en amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP: Loop-Mediated Isothermal Amplification) para determinar su presencia en Pinus pinaster Aiton y Pinus radiata D. Don en condiciones de campo, contribuyendo así al desarrollo de estrategias eficientes de vigilancia y manejo de la enfermedad.

Material y métodos: En tres experimentos diferentes, se comparó la tasa de detección de B. xylophilus con el kit LAMP comparándola con la obtenida con el método tradicional para la extracción de nematodos, la técnica del embudo de Baermann. Ambas metodologías se utilizaron para la detección de cepas de B. xylophilus de diferentes orígenes (español, portugués, asiático y estadounidense), tanto en astillas de P. pinaster inoculadas directamente como en muestras de plántulas de P. radiata y P. pinaster artificialmente inoculadas.

Principales resultados: El kit LAMP identificó con éxito las cepas de B. xylophilus de todos los orígenes estudiados. Se observó una disminución en la tasa de detección a medida que transcurrían los días desde la inoculación, siendo el nivel de detección a los 90 días después de la inoculación (DAI) en astillas de madera de P. pinaster del 18%. En planta, a los 70 DAI no se detectaron nematodos utilizando el kit LAMP, mientras que se extrajeron nematodos del 83% de las muestras utilizando la técnica del embudo de Baermann, si bien en menor número que en otras fechas.

Aspectos destacados de la investigación: El kit comercial LAMP es un método sencillo y rápido para la detección de B. xylophilus pero no está totalmente adaptado para su utilización en campo en las especies estudiadas en este trabajo.